Було розроблено амперометричний біосенсор для визначення концентрації лактату. Як біоселективний елемент біосенсора виступав фермент лактатоксидаза, коіммобілізована з бичачим сироватковим альбуміном за допомогою ковалентної зшивки глутаральдегідом на поверхні амперометричного перетворювача. Як перетворювачі виступали платинові дискові електроди (d = 500 мкм ). Розроблений біосенсор демонстрував високу чутливість до лактату, з мінімальною межею визначення - 3 мкМ. Лінійний діапазон роботи біосенсора становив від 5 мкМ до 300-350 мкМ лактату. Показано, що запропонований біосенсор характеризувався високою відтворюваністю відгуків протягом кількох годин безперервного вимірювання, з похибкою вимірювання RSD = 3.4%, та доброю операційною стабільністю протягом кількох днів. Проаналізовано та підібрано оптимальні умови зберігання лактатного біосенсора. Так, при зберіганні в буферному розчині при +4°С протягом місяця біосенсор втрачав менше 50% активності. Перевірено вплив характеристик буферного розчину (буферна ємність та іонна сила) на роботу розробленого біосенсора. Показано, що розроблений біосенсор на основі лактатоксидази можна з успіхом використовувати для аналізу лактату в реальних біологічних рідинах.
The amperometric biosensor was developed f&or determination of lactate concentration. As a bioselective element we used the enzyme lactate oxidase, coimmobilized with bovine serum albumin on the surface of amperometric transducer by glutaraldehyde covalent crosslinking. The platinum disc elec&trodes served as transducers. The developed biosensor was highly sensitive to lactate, with a minimum limit of determination of lactate concentrations 3 мкм and linear range 5 мкм to 300-350 mM. It was shown that the proposed biosensor was characteri&zed by high response replicability during several hours of non-stop measurement (the accuracy of measurement RSD = 3.4%) and satisfactory operational stability for several days. Optimal conditions for biosensor storage were analyzed and defined. One-&month storage in the buffer solution at + 4 °C resulted in less than 50% loss of the biosensor activity. The impact of parameters of buffer solution (capacity and ionic strength) on the biosensor operation was analyzed. It was shown that the develope&d biosensor based on lactateoxidase used can successfully be used for lactate analysis in real biological liquids.
