Based on nucleotide sequences of sex-specific DNA-markers of salmonid fishes the oligonucleotide primers for polymerase chain reaction were selected with purpose on rapid diagnostic of sex in rainbow trout Onchorhynchus mykiss, brown trout Salmo trutta,huchen Hucho hucho and grayling Thymallus thymallus. The specify of amplification was determined by nucleotide sequence analysis of PCR-products. All amplified fragments were referred to sex-specific locuses of Y chromosomes in males of investigated fish species. The PCR-products were in size of 880, 607, 521 and 558 for rainbow trout, brown trout, grayling and huchen respectively. Thus the sex determination in above mentioned fish species and identification of genotypic males under process of hormonalsex reversion can be provided using conventional PCR. Present method relates to rapid diagnostics because the data analysis and return of results back to fish farm take one single day.
На основі нуклеотидних послідовностей статевоспецифічних ДНК-маркерів лососевих риб було підібрано олігонуклеотидні праймери для полімеразної ланцюгової реакції з метою експрес-діагностики статі у райдужної форелі (Onchorhynchus mykiss), струмкової форелі (Salmo trutta), дунайського лосося (Hucho hucho) та харіуса є&вропейського (Thymallus thymallus). Специфічність ампліфікації перевірено нуклеотидним аналізом послідовності продуктів ПЛР. Усі ампліфіковані фрагменти відповідали статевоспецифічним локусам Y-хромосоми самців досліджуваних видів риб. Розміри амплік&онів для райдужної форелі, струмкової форелі, харіуса та дунайського лосося становили 880, 607, 521 та 558 пар нуклеотидів відповідно. Таким чином, стать зазначених видів риб може бути визначена за допомогою звичайної ПЛР, що уможливить ідентифікацію& генотипових самців під час процесу гормональної реверсії статі у риб. Цей метод належить до експрес-діагностики, оскільки аналіз даних та повернення результатів до рибного господарства здійснюються упродовж однієї доби.
На основе нуклеотидных посл&едовательностей полспецифических ДНК-маркеров лососевых рыб были подобраны олигонуклеотидные праймеры для полимеразной цепной реакции с целью экспресс- диагностики пола у радужной форели Onchorhynchus mykiss, ручьевой форели Salmo trutta, дунайского &лосося Hucho hucho и хариуса европейского Thymallus thymallus. Специфичность амплификации проверена нуклеотидным анализом последовательности продуктов ПЦР. Все амплифицированные фрагменты отвечали полспецифическим локусам Y-хромосомы самцов исследуем&ых видов рыб. Размеры амликонов для радужной форели, ручьевой форели, хариуса и дунайского лосося составляли 880, 607, 521 и 558 пар нуклеотидов соответственно. Таким образом, пол вышеуказанных видов рыб может быть определен с помощью обычной ПЦР, чт&о позволит идентифицировать генотипических самцов во время процесса гормональной реверсии пола у рыб. Этот метод относится к экспресс-диагностике, поскольку анализ данных и возвращение результатов в рыбное хозяйство осуществляются в течение одних сут&ок.
